MC3T3-E1-Zellen
Allgemeine Informationen
Beschreibung | MC3T3-E1 ist eine präosteoblastische Zelllinie, die aus der Calvaria eines Mausembryos gewonnen wird. Diese Zellen werden in großem Umfang für die Untersuchung der Osteogenese verwendet, insbesondere für die Untersuchung der molekularen und zellulären Mechanismen, die der Knochenbildung und -differenzierung zugrunde liegen. Die Zelllinie MC3T3-E1 ist bekannt für ihre robuste Fähigkeit, sich in vitro in Osteoblasten zu differenzieren, ein Prozess, der durch Ascorbinsäure und Beta-Glycerophosphat stimuliert werden kann. Diese Differenzierung ist durch die Expression wichtiger osteogener Marker wie alkalische Phosphatase, Osteocalcin und Typ-I-Kollagen gekennzeichnet. MC3T3-E1-Zellen spielen eine wichtige Rolle in der Forschung im Bereich der Knochenbiologie, einschließlich der Untersuchung der Ablagerung von Knochenmatrix und Mineralisierung. Diese Zellen sind ein zuverlässiges Modell für die Untersuchung der Auswirkungen verschiedener Medikamente, Hormone und genetischer Veränderungen auf die Osteoblastenfunktion und die Knochenbildung. Darüber hinaus ist die MC3T3-E1-Zelllinie wertvoll für die Untersuchung pathologischer Zustände wie Osteoporose und anderer knochenbezogener Krankheiten. Ihre einfache Kultivierung und gut charakterisierte Reaktion auf osteogene Stimuli machen sie zu einer bevorzugten Wahl für Forscher, die die Komplexität der Knochenphysiologie und -pathologie entschlüsseln wollen. |
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Organismus | Maus |
Gewebe | Knochen, Kalvarienberg |
Anwendungen | In vitro-Differenzierung von Osteoblasten |
Synonyme | Mc3T3-E1, MC3T3E1, MC-3T3-E1, MC 3T3-E1 |
Merkmale
Alter | 1 Tag |
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Geschlecht | Nicht spezifiziert |
Morphologie | Fibroblastenähnlich |
Zelltyp | Osteoblasten |
Wachstumseigenschaften | Adhärent |
Identifikatoren / Biologische Schutzstufe / Zitation
Zitat | MC3T3-E1 (Cytion Katalognummer 305187) |
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Biosicherheitsstufe | 1 |
Expression / Mutation
Tumorigene | Ja, bei immundefizienten Mäusen |
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Produkte | Kollagen |
Handhabung
Nährboden | Alpha MEM, w: 2,0 mM stabiles Glutamin, w: Ribonukleoside, w: Deoxyribonukleoside, w: 1,0 mM Natriumpyruvat, w: 2,2g/L NaHCO3, w/o: Ascorbinsäure |
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Mittlere Supplemente | Supplemente des Mediums mit 10% FBS |
Passage-Lösung | Accutase |
Verdopplungszeit | 24 bis 48 Stunden |
Subkultivierung | Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten. |
Splitverhältnis | 1:2 bis 1:4 |
Medienwechsel | 2 bis 3 Mal pro Woche |
Einfriermedium | CM-1 (Cytion Katalognummer 800100) oder CM-ACF (Cytion Katalognummer 806100) |
Handhabung von kryokonservierten Kulturen |
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Qualitätskontrolle / Genetisches Profil / HLA
Sterilität | Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen. Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft. |
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Erforderliche Produkte
- eine schonende Alternative zu Trypsin
Accutase ist eine Zellablösungslösung, die die Zellkulturindustrie revolutioniert. Es ist eine Mischung aus proteolytischen und kollagenolytischen Enzymen, die die Wirkung von Trypsin und Kollagenase nachahmt. Im Gegensatz zu Trypsin enthält Accutase keine Säugetier
- oder Bakterienbestandteile und ist sehr viel schonender für die Zellen, was es zu einer idealen Lösung für die routinemäßige Ablösung von Zellen von Standardplastikgefäßen für die Gewebekultur und adhäsionsbeschichteten Plastikgefäßen macht. In diesem Blogbeitrag gehen wir auf die Vorteile und Einsatzmöglichkeiten von Accutase ein und zeigen, wie es die Zellkultur verändert.
Vorteile von Accutase
Accutase hat mehrere Vorteile gegenüber herkömmlichen Trypsinlösungen. Erstens kann es immer dann eingesetzt werden, wenn eine sanfte und effiziente Ablösung von adhärenten Zelllinien erforderlich ist, und ist somit ein direkter Ersatz für Trypsin. Zweitens funktioniert Accutase sehr gut bei embryonalen und neuronalen Stammzellen, und es hat sich gezeigt, dass die Lebensfähigkeit dieser Zellen nach der Passage erhalten bleibt. Drittens bewahrt Accutase die meisten Epitope für die anschließende durchflusszytometrische Analyse, was es ideal für die Analyse von Zelloberflächenmarkern macht.
Außerdem muss Accutase bei der Passage von adhärenten Zellen nicht neutralisiert werden. Durch die Zugabe weiterer Medien nach der Zellteilung wird die Accutase verdünnt, so dass sie nicht mehr in der Lage ist, Zellen abzulösen. Dadurch entfällt der Schritt der Inaktivierung, und die Zellkulturtechniker sparen Zeit. Schließlich muss Accutase nicht aliquotiert werden, und eine Flasche ist im Kühlschrank 2 Monate lang haltbar.
Anwendungen von Accutase
Accutase ist ein direkter Ersatz für Trypsinlösung und kann für die Passage von Zelllinien verwendet werden. Darüber hinaus eignet sich Accutase gut zum Ablösen von Zellen für die Analyse vieler Zelloberflächenmarker mittels Durchflusszytometrie und für die Zellsortierung. Andere nachgeschaltete Anwendungen der Accutase-Behandlung umfassen die Analyse von Zelloberflächenmarkern, Viruswachstumstests, Zellproliferation, Tumorzellmigrationsassays, routinemäßige Zellpassage, Produktionsskalierung (Bioreaktor) und Durchflusszytometrie.
Zusammensetzung von Accutase
Accutase enthält keine Bestandteile von Säugetieren oder Bakterien und ist eine natürliche Enzymmischung mit proteolytischer und kollagenolytischer Enzymaktivität. Es ist in einer viel niedrigeren Konzentration als Trypsin und Kollagenase formuliert, wodurch es weniger toxisch und sanfter, aber genauso wirksam ist.
Wirksamkeit von Accutase
Accutase ist nachweislich effizient bei der Ablösung von Primär
- und Stammzellen und erhält die hohe Lebensfähigkeit der Zellen im Vergleich zu Enzymen tierischen Ursprungs wie Trypsin. 100 % der Zellen werden nach 10 Minuten zurückgewonnen, und dank der Selbstverdauung von Accutase ist es unbedenklich, Zellen bis zu 45 Minuten in Accutase zu belassen.
Zusammenfassung
Zusammenfassend lässt sich sagen, dass Accutase eine leistungsstarke Lösung ist, die das Spiel in der Zellkultur verändert. Mit seiner sanften Natur, Effizienz und Vielseitigkeit ist Accutase die ideale Alternative zu Trypsin. Wenn Sie nach einer zuverlässigen und effizienten Lösung für die Zellablösung suchen, ist Accutase die richtige Lösung für Sie.
Zu den wichtigsten Eigenschaften von Freeze Medium CM-1 gehören:
Breite Kompatibilität: Wirksam für eine breite Palette von Zelltypen, einschließlich Primärzellen, Stammzellen und etablierte Zelllinien.
Hohe Lebensfähigkeit: Optimiert, um die Wiederherstellung und Lebensfähigkeit von Zellen nach dem Auftauen zu maximieren und zuverlässige Versuchsergebnisse zu gewährleisten.
Fertig zum Gebrauch: Praktisch vorbereitet und sterilisiert für die sofortige Anwendung, wodurch die Vorbereitungszeit und das Kontaminationsrisiko reduziert werden.
Erhöhte Stabilität: Bewahrt eine gleichbleibende Leistung unter Standard-Kryokonservierungsbedingungen und gewährleistet reproduzierbare Ergebnisse.
Lange Haltbarkeitsdauer: CM-1 ist ein serumhaltiges, gebrauchsfertiges Kryokonservierungsmedium, das bis zu einem Jahr im Kühlschrank aufbewahrt werden kann.
Verwendung von CM-1 zum Einfrieren von Zellen
Gehen Sie wie folgt vor, um CM-1 für das Einfrieren von adhärenten und Suspensionszellen zu verwenden
Bei adhärenten Zellen waschen Sie diese und lösen sie vom Kultursubstrat. Bei Suspensionszellen fahren Sie direkt mit dem nächsten Schritt fort.
Zählen Sie die Zellen, um sicherzustellen, dass sie die richtige Konzentration haben.
Zentrifugieren Sie die Zellen, um sie zu pelletieren, und resuspendieren Sie sie dann in CM-1-Gefriermedium.
Überführen Sie die resuspendierten Zellen in Kryogefäße.
Verwenden Sie eine langsame Gefriermethode, bevor Sie die Zellen in die Langzeitlagerung überführen
🥶 Methode
🔍 Beschreibung
💡 Schritte
❄️
Manuelles Einfrieren
Ein schrittweises Verfahren, bei dem die Temperatur schrittweise gesenkt wird, um die Lebensfähigkeit der Zellen zu gewährleisten
1️⃣ Zellen in Gefriermedium für 40 Minuten bei 4°C einfrieren.
2️⃣ Für 24 Stunden in einen Gefrierschrank mit -80°C transferieren.
3️⃣ Zellen zur Langzeitkonservierung in flüssigem Stickstoff lagern
🧊
Verwendung von Mr. Frosty
Ein praktisches Gerät, das kontrollierte Einfrierraten ohne elektrische Energie ermöglicht
1️⃣ Bereiten Sie die Zellen in Kryoröhrchen mit Gefriermedium vor.
2️⃣ Kryovials in den Mr. Frosty-Behälter stellen.
3️⃣ Vor dem Umfüllen in flüssigen Stickstoff 24 Stunden lang bei -80 °C lagern
🧬
Controlled-Rate Freezer
Ein hochpräziser Gefrierschrank von Thermo Fisher oder anderen Herstellern, der für eine kontrollierte Temperaturabsenkung ausgelegt ist
1️⃣ Programmieren Sie das Gerät so, dass die Temperatur schrittweise gesenkt wird.
2️⃣ Legen Sie die vorbereiteten Zellen in den Gefrierschrank.
3️⃣ Nach dem Einfrierzyklus die Zellen in flüssigen Stickstoff überführen
Lagern Sie die Kryoflaschen bei Temperaturen unter -130°C oder in flüssigem Stickstoff zur langfristigen Aufbewahrung.
Inhaltsstoffe
Enthält FBS, DMSO, Glucose, Salze
Pufferkapazität: pH = 7,2 bis 7,6
Cytion's Freeze Medium CM-1 bietet eine zuverlässige Lösung für die Kryokonservierung, die eine hohe Lebensfähigkeit und Funktionalität der Zellen nach dem Auftauen für eine Vielzahl von Forschungsanwendungen gewährleistet.
Zu den wichtigsten Eigenschaften von Freeze Medium CM-1 gehören:
Breite Kompatibilität: Wirksam für eine breite Palette von Zelltypen, einschließlich Primärzellen, Stammzellen und etablierte Zelllinien.
Hohe Lebensfähigkeit: Optimiert, um die Wiederherstellung und Lebensfähigkeit von Zellen nach dem Auftauen zu maximieren und zuverlässige Versuchsergebnisse zu gewährleisten.
Fertig zum Gebrauch: Praktisch vorbereitet und sterilisiert für die sofortige Anwendung, wodurch die Vorbereitungszeit und das Kontaminationsrisiko reduziert werden.
Erhöhte Stabilität: Bewahrt eine gleichbleibende Leistung unter Standard-Kryokonservierungsbedingungen und gewährleistet reproduzierbare Ergebnisse.
Lange Haltbarkeitsdauer: CM-1 ist ein serumhaltiges, gebrauchsfertiges Kryokonservierungsmedium, das bis zu einem Jahr im Kühlschrank aufbewahrt werden kann.
Verwendung von CM-1 zum Einfrieren von Zellen
Gehen Sie wie folgt vor, um CM-1 für das Einfrieren von adhärenten und Suspensionszellen zu verwenden
Bei adhärenten Zellen waschen Sie diese und lösen sie vom Kultursubstrat. Bei Suspensionszellen fahren Sie direkt mit dem nächsten Schritt fort.
Zählen Sie die Zellen, um sicherzustellen, dass sie die richtige Konzentration haben.
Zentrifugieren Sie die Zellen, um sie zu pelletieren, und resuspendieren Sie sie dann in CM-1-Gefriermedium.
Überführen Sie die resuspendierten Zellen in Kryogefäße.
Verwenden Sie eine langsame Gefriermethode, bevor Sie die Zellen in die Langzeitlagerung überführen
🥶 Methode
🔍 Beschreibung
💡 Schritte
❄️
Manuelles Einfrieren
Ein schrittweises Verfahren, bei dem die Temperatur schrittweise gesenkt wird, um die Lebensfähigkeit der Zellen zu gewährleisten
1️⃣ Zellen in Gefriermedium für 40 Minuten bei 4°C einfrieren.
2️⃣ Für 24 Stunden in einen Gefrierschrank mit -80°C transferieren.
3️⃣ Zellen zur Langzeitkonservierung in flüssigem Stickstoff lagern
🧊
Verwendung von Mr. Frosty
Ein praktisches Gerät, das kontrollierte Einfrierraten ohne elektrische Energie ermöglicht
1️⃣ Bereiten Sie die Zellen in Kryoröhrchen mit Gefriermedium vor.
2️⃣ Kryovials in den Mr. Frosty-Behälter stellen.
3️⃣ Vor dem Umfüllen in flüssigen Stickstoff 24 Stunden lang bei -80 °C lagern
🧬
Controlled-Rate Freezer
Ein hochpräziser Gefrierschrank von Thermo Fisher oder anderen Herstellern, der für eine kontrollierte Temperaturabsenkung ausgelegt ist
1️⃣ Programmieren Sie das Gerät so, dass die Temperatur schrittweise gesenkt wird.
2️⃣ Legen Sie die vorbereiteten Zellen in den Gefrierschrank.
3️⃣ Nach dem Einfrierzyklus die Zellen in flüssigen Stickstoff überführen
Lagern Sie die Kryoflaschen bei Temperaturen unter -130°C oder in flüssigem Stickstoff zur langfristigen Aufbewahrung.
Inhaltsstoffe
Enthält FBS, DMSO, Glucose, Salze
Pufferkapazität: pH = 7,2 bis 7,6
Cytion's Freeze Medium CM-1 bietet eine zuverlässige Lösung für die Kryokonservierung, die eine hohe Lebensfähigkeit und Funktionalität der Zellen nach dem Auftauen für eine Vielzahl von Forschungsanwendungen gewährleistet.
Zu den wichtigsten Eigenschaften von Freeze Medium CM-1 gehören:
Breite Kompatibilität: Wirksam für eine breite Palette von Zelltypen, einschließlich Primärzellen, Stammzellen und etablierte Zelllinien.
Hohe Lebensfähigkeit: Optimiert, um die Wiederherstellung und Lebensfähigkeit von Zellen nach dem Auftauen zu maximieren und zuverlässige Versuchsergebnisse zu gewährleisten.
Fertig zum Gebrauch: Praktisch vorbereitet und sterilisiert für die sofortige Anwendung, wodurch die Vorbereitungszeit und das Kontaminationsrisiko reduziert werden.
Erhöhte Stabilität: Bewahrt eine gleichbleibende Leistung unter Standard-Kryokonservierungsbedingungen und gewährleistet reproduzierbare Ergebnisse.
Lange Haltbarkeitsdauer: CM-1 ist ein serumhaltiges, gebrauchsfertiges Kryokonservierungsmedium, das bis zu einem Jahr im Kühlschrank aufbewahrt werden kann.
Verwendung von CM-1 zum Einfrieren von Zellen
Gehen Sie wie folgt vor, um CM-1 für das Einfrieren von adhärenten und Suspensionszellen zu verwenden
Bei adhärenten Zellen waschen Sie diese und lösen sie vom Kultursubstrat. Bei Suspensionszellen fahren Sie direkt mit dem nächsten Schritt fort.
Zählen Sie die Zellen, um sicherzustellen, dass sie die richtige Konzentration haben.
Zentrifugieren Sie die Zellen, um sie zu pelletieren, und resuspendieren Sie sie dann in CM-1-Gefriermedium.
Überführen Sie die resuspendierten Zellen in Kryogefäße.
Verwenden Sie eine langsame Gefriermethode, bevor Sie die Zellen in die Langzeitlagerung überführen
🥶 Methode
🔍 Beschreibung
💡 Schritte
❄️
Manuelles Einfrieren
Ein schrittweises Verfahren, bei dem die Temperatur schrittweise gesenkt wird, um die Lebensfähigkeit der Zellen zu gewährleisten
1️⃣ Zellen in Gefriermedium für 40 Minuten bei 4°C einfrieren.
2️⃣ Für 24 Stunden in einen Gefrierschrank mit -80°C transferieren.
3️⃣ Zellen zur Langzeitkonservierung in flüssigem Stickstoff lagern
🧊
Verwendung von Mr. Frosty
Ein praktisches Gerät, das kontrollierte Einfrierraten ohne elektrische Energie ermöglicht
1️⃣ Bereiten Sie die Zellen in Kryoröhrchen mit Gefriermedium vor.
2️⃣ Kryovials in den Mr. Frosty-Behälter stellen.
3️⃣ Vor dem Umfüllen in flüssigen Stickstoff 24 Stunden lang bei -80 °C lagern
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Controlled-Rate Freezer
Ein hochpräziser Gefrierschrank von Thermo Fisher oder anderen Herstellern, der für eine kontrollierte Temperaturabsenkung ausgelegt ist
1️⃣ Programmieren Sie das Gerät so, dass die Temperatur schrittweise gesenkt wird.
2️⃣ Legen Sie die vorbereiteten Zellen in den Gefrierschrank.
3️⃣ Nach dem Einfrierzyklus die Zellen in flüssigen Stickstoff überführen
Lagern Sie die Kryoflaschen bei Temperaturen unter -130°C oder in flüssigem Stickstoff zur langfristigen Aufbewahrung.
Inhaltsstoffe
Enthält FBS, DMSO, Glucose, Salze
Pufferkapazität: pH = 7,2 bis 7,6
Cytion's Freeze Medium CM-1 bietet eine zuverlässige Lösung für die Kryokonservierung, die eine hohe Lebensfähigkeit und Funktionalität der Zellen nach dem Auftauen für eine Vielzahl von Forschungsanwendungen gewährleistet.
Hauptmerkmale von Freeze Medium CM-ACF
Serumfreie Formulierung: Eliminiert die mit Serum verbundenen Schwankungen und Risiken und bietet eine definierte und kontrollierte Umgebung für eine Vielzahl von Zelltypen, einschließlich Primärzellen, Stammzellen und etablierte Zelllinien.
Breite Kompatibilität: Wirksam für eine breite Palette von Zelltypen, einschließlich Primärzellen, Stammzellen und etablierte Zelllinien.
Hohe Lebensfähigkeit: Optimiert, um die Wiederherstellung und Lebensfähigkeit der Zellen nach dem Auftauen zu maximieren und zuverlässige experimentelle Ergebnisse zu gewährleisten.
Fertig zum Gebrauch: Praktisch vorbereitet und sterilisiert für die sofortige Anwendung, wodurch die Vorbereitungszeit und das Kontaminationsrisiko reduziert werden.
Erhöhte Stabilität: Bewahrt eine gleichbleibende Leistung unter Standard-Kryokonservierungsbedingungen und gewährleistet reproduzierbare Ergebnisse.
Lange Haltbarkeitsdauer: CM-ACF ist ein serumhaltiges, gebrauchsfertiges Kryokonservierungsmedium, das bis zu einem Jahr im Kühlschrank aufbewahrt werden kann.
Verwendung von CM-ACF zum Einfrieren von Zellen
Gehen Sie wie folgt vor, um CM-ACF für das Einfrieren von adhärenten und Suspensionszellen zu verwenden:
Vorbereitung:
Für adhärente Zellen: Waschen Sie sie und lösen Sie sie vom Kultursubstrat ab.
Für Suspensionszellen: Fahren Sie direkt mit dem nächsten Schritt fort.
Zellzählung: Sicherstellen, dass die Zellen die richtige Konzentration aufweisen.
Zentrifugieren: Pelletieren Sie die Zellen und resuspendieren Sie sie in CM-ACF-Gefriermedium.
Kryoflaschen-Transfer: Überführen Sie die resuspendierten Zellen in Kryoflaschen.
Einfriervorgang: Verwenden Sie ein langsames Einfrierverfahren, bevor Sie die Zellen in die Langzeitlagerung überführen.
Einfriermethoden
Methode
Beschreibung
Schritte
❄️ Manuelles Einfrieren
Ein schrittweises Verfahren, bei dem die Temperatur schrittweise gesenkt wird, um die Lebensfähigkeit der Zellen zu gewährleisten.
1. Legen Sie die Zellen in Gefriermedium für 40 Minuten in einen 4°C Gefrierschrank. 2. Für 24 Stunden in einen Gefrierschrank mit -80°C überführen. 3. Lagern Sie die Zellen zur langfristigen Konservierung in flüssigem Stickstoff.
🧊 Verwendung von Mr. Frosty
Ein praktisches Gerät, das kontrollierte Einfrierraten ohne elektrische Energie ermöglicht.
1. Bereiten Sie Zellen in Kryovials mit Gefriermedium vor. 2. Kryovials in den Mr. Frosty-Behälter stellen. 3. Bei -80°C 24 Stunden lang lagern, bevor sie in flüssigen Stickstoff überführt werden.
🧬 Gefrierschrank mit kontrollierter Geschwindigkeit
Ein hochpräziser Gefrierschrank von Thermo Fisher oder anderen Herstellern, der für eine kontrollierte Temperaturabsenkung ausgelegt ist.
1. Programmieren Sie das Gerät so, dass die Temperatur schrittweise gesenkt wird. 2. Legen Sie die vorbereiteten Zellen in den Gefrierschrank. 3. Nach dem Gefrierzyklus die Zellen in flüssigen Stickstoff überführen.
Langfristige Lagerung
Lagern Sie die Kryovials bei Temperaturen unter -130°C oder in flüssigem Stickstoff, um sie langfristig zu konservieren.
Inhaltsstoffe
Enthält DMSO, Glucose, Salze
Pufferkapazität: pH = 7,2 bis 7,6
Cytion's Freeze Medium CM-ACF bietet eine zuverlässige Lösung für die Kryokonservierung, die eine hohe Lebensfähigkeit und Funktionalität der Zellen nach dem Auftauen für eine Vielzahl von Forschungsanwendungen gewährleistet.
Hauptmerkmale von Freeze Medium CM-ACF
Serumfreie Formulierung: Eliminiert die mit Serum verbundenen Schwankungen und Risiken und bietet eine definierte und kontrollierte Umgebung für eine Vielzahl von Zelltypen, einschließlich Primärzellen, Stammzellen und etablierte Zelllinien.
Breite Kompatibilität: Wirksam für eine breite Palette von Zelltypen, einschließlich Primärzellen, Stammzellen und etablierte Zelllinien.
Hohe Lebensfähigkeit: Optimiert, um die Wiederherstellung und Lebensfähigkeit der Zellen nach dem Auftauen zu maximieren und zuverlässige experimentelle Ergebnisse zu gewährleisten.
Fertig zum Gebrauch: Praktisch vorbereitet und sterilisiert für die sofortige Anwendung, wodurch die Vorbereitungszeit und das Kontaminationsrisiko reduziert werden.
Erhöhte Stabilität: Bewahrt eine gleichbleibende Leistung unter Standard-Kryokonservierungsbedingungen und gewährleistet reproduzierbare Ergebnisse.
Lange Haltbarkeitsdauer: CM-ACF ist ein serumhaltiges, gebrauchsfertiges Kryokonservierungsmedium, das bis zu einem Jahr im Kühlschrank aufbewahrt werden kann.
Verwendung von CM-ACF zum Einfrieren von Zellen
Gehen Sie wie folgt vor, um CM-ACF für das Einfrieren von adhärenten und Suspensionszellen zu verwenden:
Vorbereitung:
Für adhärente Zellen: Waschen Sie sie und lösen Sie sie vom Kultursubstrat ab.
Für Suspensionszellen: Fahren Sie direkt mit dem nächsten Schritt fort.
Zellzählung: Sicherstellen, dass die Zellen die richtige Konzentration aufweisen.
Zentrifugieren: Pelletieren Sie die Zellen und resuspendieren Sie sie in CM-ACF-Gefriermedium.
Kryoflaschen-Transfer: Überführen Sie die resuspendierten Zellen in Kryoflaschen.
Einfriervorgang: Verwenden Sie ein langsames Einfrierverfahren, bevor Sie die Zellen in die Langzeitlagerung überführen.
Einfriermethoden
Methode
Beschreibung
Schritte
❄️ Manuelles Einfrieren
Ein schrittweises Verfahren, bei dem die Temperatur schrittweise gesenkt wird, um die Lebensfähigkeit der Zellen zu gewährleisten.
1. Legen Sie die Zellen in Gefriermedium für 40 Minuten in einen 4°C Gefrierschrank. 2. Für 24 Stunden in einen Gefrierschrank mit -80°C überführen. 3. Lagern Sie die Zellen zur langfristigen Konservierung in flüssigem Stickstoff.
🧊 Verwendung von Mr. Frosty
Ein praktisches Gerät, das kontrollierte Einfrierraten ohne elektrische Energie ermöglicht.
1. Bereiten Sie Zellen in Kryovials mit Gefriermedium vor. 2. Kryovials in den Mr. Frosty-Behälter stellen. 3. Bei -80°C 24 Stunden lang lagern, bevor sie in flüssigen Stickstoff überführt werden.
🧬 Gefrierschrank mit kontrollierter Geschwindigkeit
Ein hochpräziser Gefrierschrank von Thermo Fisher oder anderen Herstellern, der für eine kontrollierte Temperaturabsenkung ausgelegt ist.
1. Programmieren Sie das Gerät so, dass die Temperatur schrittweise gesenkt wird. 2. Legen Sie die vorbereiteten Zellen in den Gefrierschrank. 3. Nach dem Gefrierzyklus die Zellen in flüssigen Stickstoff überführen.
Langfristige Lagerung
Lagern Sie die Kryovials bei Temperaturen unter -130°C oder in flüssigem Stickstoff, um sie langfristig zu konservieren.
Inhaltsstoffe
Enthält DMSO, Glucose, Salze
Pufferkapazität: pH = 7,2 bis 7,6
Cytion's Freeze Medium CM-ACF bietet eine zuverlässige Lösung für die Kryokonservierung, die eine hohe Lebensfähigkeit und Funktionalität der Zellen nach dem Auftauen für eine Vielzahl von Forschungsanwendungen gewährleistet.
Hauptmerkmale von Freeze Medium CM-ACF
Serumfreie Formulierung: Eliminiert die mit Serum verbundenen Schwankungen und Risiken und bietet eine definierte und kontrollierte Umgebung für eine Vielzahl von Zelltypen, einschließlich Primärzellen, Stammzellen und etablierte Zelllinien.
Breite Kompatibilität: Wirksam für eine breite Palette von Zelltypen, einschließlich Primärzellen, Stammzellen und etablierte Zelllinien.
Hohe Lebensfähigkeit: Optimiert, um die Wiederherstellung und Lebensfähigkeit der Zellen nach dem Auftauen zu maximieren und zuverlässige experimentelle Ergebnisse zu gewährleisten.
Fertig zum Gebrauch: Praktisch vorbereitet und sterilisiert für die sofortige Anwendung, wodurch die Vorbereitungszeit und das Kontaminationsrisiko reduziert werden.
Erhöhte Stabilität: Bewahrt eine gleichbleibende Leistung unter Standard-Kryokonservierungsbedingungen und gewährleistet reproduzierbare Ergebnisse.
Lange Haltbarkeitsdauer: CM-ACF ist ein serumhaltiges, gebrauchsfertiges Kryokonservierungsmedium, das bis zu einem Jahr im Kühlschrank aufbewahrt werden kann.
Verwendung von CM-ACF zum Einfrieren von Zellen
Gehen Sie wie folgt vor, um CM-ACF für das Einfrieren von adhärenten und Suspensionszellen zu verwenden:
Vorbereitung:
Für adhärente Zellen: Waschen Sie sie und lösen Sie sie vom Kultursubstrat ab.
Für Suspensionszellen: Fahren Sie direkt mit dem nächsten Schritt fort.
Zellzählung: Sicherstellen, dass die Zellen die richtige Konzentration aufweisen.
Zentrifugieren: Pelletieren Sie die Zellen und resuspendieren Sie sie in CM-ACF-Gefriermedium.
Kryoflaschen-Transfer: Überführen Sie die resuspendierten Zellen in Kryoflaschen.
Einfriervorgang: Verwenden Sie ein langsames Einfrierverfahren, bevor Sie die Zellen in die Langzeitlagerung überführen.
Einfriermethoden
Methode
Beschreibung
Schritte
❄️ Manuelles Einfrieren
Ein schrittweises Verfahren, bei dem die Temperatur schrittweise gesenkt wird, um die Lebensfähigkeit der Zellen zu gewährleisten.
1. Legen Sie die Zellen in Gefriermedium für 40 Minuten in einen 4°C Gefrierschrank. 2. Für 24 Stunden in einen Gefrierschrank mit -80°C überführen. 3. Lagern Sie die Zellen zur langfristigen Konservierung in flüssigem Stickstoff.
🧊 Verwendung von Mr. Frosty
Ein praktisches Gerät, das kontrollierte Einfrierraten ohne elektrische Energie ermöglicht.
1. Bereiten Sie Zellen in Kryovials mit Gefriermedium vor. 2. Kryovials in den Mr. Frosty-Behälter stellen. 3. Bei -80°C 24 Stunden lang lagern, bevor sie in flüssigen Stickstoff überführt werden.
🧬 Gefrierschrank mit kontrollierter Geschwindigkeit
Ein hochpräziser Gefrierschrank von Thermo Fisher oder anderen Herstellern, der für eine kontrollierte Temperaturabsenkung ausgelegt ist.
1. Programmieren Sie das Gerät so, dass die Temperatur schrittweise gesenkt wird. 2. Legen Sie die vorbereiteten Zellen in den Gefrierschrank. 3. Nach dem Gefrierzyklus die Zellen in flüssigen Stickstoff überführen.
Langfristige Lagerung
Lagern Sie die Kryovials bei Temperaturen unter -130°C oder in flüssigem Stickstoff, um sie langfristig zu konservieren.
Inhaltsstoffe
Enthält DMSO, Glucose, Salze
Pufferkapazität: pH = 7,2 bis 7,6
Cytion's Freeze Medium CM-ACF bietet eine zuverlässige Lösung für die Kryokonservierung, die eine hohe Lebensfähigkeit und Funktionalität der Zellen nach dem Auftauen für eine Vielzahl von Forschungsanwendungen gewährleistet.